Влияние ультрафиолетового кросслинкинга на ультраструктурную организацию роговицы в эксперименте
Ключевые слова:
ультраструктурный анализ роговицы, ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы, морфологические исследования роговицыАннотация
Ультрафиолетовый (УФ) кросслинкинг (КРЛ) роговицы — эффективный метод лечения прогрессирующих дегенераций роговой оболочки. Традиционно для КРЛ используется раствор 0,1% рибофлавина и 20% декстрана, при этом последний оказывает на роговицу обезвоживающее действие, сопровождающееся снижением корнеальной толщины.
Эта особенность препарата ограничивает возможность его применения, в частности, у пациентов с тонкой роговицей
(менее 450 мкм). В настоящее время востребованными остаются исследования, направленные на создание растворов для КРЛ с противоотечным эффектом и не столь выраженным снижением толщины роговицы. Оценка эффективности и безопасности таких растворов посредством морфологического анализа роговицы на ультраструктурном уровне является важным этапом их доклинического исследования.
Цель. Изучить влияние УФ-КРЛ с разработанным фотосенсибилизатором «Рибодекс Лайт» на особенности ультраструктурной организации роговицы крыс.
Материал и методы. Эксперимент выполнен на 8 крысах (16 глаз) в 2 группах: 1-я группа — контроль (интактные),
2-я — опыт (модель КРЛ роговицы с деэпителизацией, 370 нм, 3 мВт/см2, 10 мин). Срок наблюдения — 14 и 30 суток.
Роговицы животных использовали для гистологического и электронно-микроскопического исследования. Гистопре-
параты получали по традиционной методике.
Результаты. Установлено, что передний эпителий был полностью восстановлен после оперативного вмешательства,
при этом каких-либо выраженных патологический изменений не выявлено. Ультраструктурные изменения стромы характеризовались слабовыраженным разволокнением и набуханием основного вещества. Направленность пучков коллагеновых волокон в строме сохранялась. Десцеметова мембрана соответствовала норме. На 30-е сутки после КРЛ
определялось заметное уплотнение стромы. Структура десцеметовой мембраны имела интактный вид. Клетки заднего эпителия сохраняли межклеточные контакты, однако в цитоплазме единичных эндотелиоцитов имелись признаки
дистрофических изменений в виде вакуолизации.
Заключение. Гистологический и электронно-микроскопический анализ роговицы крысы после УФ-КЛР показал следующее: состояние многослойного эпителия, Боуменовой и десцеметовой мембраны в целом соответствовало норме.
Отмечали деструкцию части кератоцитов, на 14-е сутки наблюдали набухание участков стромы, на 30-е сутки — ее
значительное уплотнение. В единичных эндотелиальных клетках имелись признаки дистрофических изменений являющихся, вероятно, следствием воздействия фототоксической дозы УФ-излучения в виду небольшой толщины деэпителизированной роговицы крысы.
Библиографические ссылки
1. Wollensak G, Spoerl E, Seiler T. Riboflavin/ultraviolet-a-induced collagen crosslinking for the treatment of keratoconus. Am J Ophthal. 2003;135(5): 620‒7. https://doi.org/10.1016/s0002-9394(02)02220-1
2. Serrao S, Lombardo G, Lombardo M. Adverse events after riboflavin/UV-A corneal cross-linking: a literature review. Int Ophthal. 2022;42(1): 337‒48. https://doi.org/10.1007/s10792-021-02019-1
3. Hafezi F, Kling S, Hafezi NL, et al. Corneal cross-linking. Prog Retin Eye Res. 2025;104: 101322. https://doi.org/10.1016/j.preteyeres.2024.101322
4. Бикбов М.М., Халимов А.Р., Бабушкин А.Э., Усубов Э.Л. Применение ультрафиолетового кросслинкинга для лечения тонких роговиц при кератоконусе. Казанский медицинский журнал. 2025;106(6): 947–55. [Bikbov MM, Khalimov AR, Babushkin AE, Usubov EL. Use of ultraviolet cross-linking for the treatment of thin corneas in keratoconus. Kazan Medical Journal. 2025;106(6): 947–55. (In Russ.).] https://doi.org/10.17816/KMJ646295
5. Халимов А.Р., Суркова В.К., Казакбаева Г.М. Строение и функции роговицы. Обзор литературы. Точка зрения. Восток–Запад. 2022;(1): 45–50. [Khalimov AR, Surkova VK, Kazakbaeva GM. The structure and function of the cornea. Literature review. Point of view. East–West. 2022;1: 45–50. (In Russ.).] https://doi.org/10.25276/2410-1257-2022-1-45-50
6. Gustafsson I, Olafsdottir T, Neumann O, et al. Early findings in a randomised controlled trial on crosslinking protocols using isoosmolar and hypoosmolar riboflavin for the treatment of progressive keratoconus. Acta Ophthal. 2025;103(1): 23‒32. https://doi.org/10.1111/aos.16736
7. Бикбов М.М., Халимов А.Р., Усубов Э.Л., Шевчук Н.Е. Морфологическая характеристика роговицы животных после ультрафиолетового кросслинкинга с гипоосмотическим раствором рибофлавина. Офтальмохирургия. 2024;4(142): 78–83. [Bikbov MM, Khalimov AR, Usubov EL, Shevchuk NE. Morphological characteristics of animal’s cornea after ultraviolet corneal crosslinking with a hypoosmolar solution of riboflavin. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2024;4(142): 78–83. (In Russ.).] https://doi.org/10.25276/0235-4160-2024-4-78-83
8. Бикбов М.М., Халимов А.Р., Усубов Э.Л., Зайнутдинова Г.Х., Валишин И.Д., Гилемзянова Л.И. Сравнительная характеристика результатов конфокальной микроскопии роговицы после УФ-А-кросслинкинга с использованием различных растворов рибофлавина в эксперименте. Офтальмология. 2024;21(4): 802–8. [Bikbov MM, Khalimov AR, Usubov EL, Zainutdinova GKh, Valishin ID, Gilemzyanova LI. Comparative characteristics of corneal confocal microscopy after UV-A cross-linking with different riboflavin solutions in experiment. Ophthalmology in Russia. 2024;21(4): 802–8. (In Russ.).] https://doi.org/10.18008/1816-5095-2024-4-802-808
9. Халимов А.Р., Суркова В.К., Халимова Л.И., Усубов Э.Л. Морфологические изменения в роговице при кератоконусе. Точка зрения. Восток-Запад. 2019;(1): 82–4. [Khalimov AR, Surkova VK, Khalimova LI, Usubov EL. Morphological changes in the cornea in keratoconus. Point of View. East–West. 2019;(1): 82–4. (In Russ.).] https://doi.org/10.25276/2410-1257-2019-1-82-84
10. Халимов А.Р., Усубов Э.Л. Морфологическая оценка изменений в роговице экспериментальных животных после ультрафиолетового кросслинкинга. Точка зрения. Восток–Запад. 2021;(1): 66–9. [Khalimov AR, Usubov EL. Morphological assessment of changes in the cornea of experimental animals after ultraviolet corneal cross-linking. Point of View. East–West. 2021;1: 66–9. (In Russ.).] https://doi.org/10.25276/2410-1257-2021-1-66-69
11. Schulz D, Iliev ME, Frueh BE, Goldblum D. In vivo pachymetry in normal eyes of rats, mice and rabbits with the optical low coherence reflectometer. Vis. Res. 2003;43(6): 723‒8. https://doi.org/10.1016/s0042-6989(03)00005-1
12. Бикбов М.М., Бикбова Г.М., Суркова В.К., Зайнуллина Н.Б. Клинические результаты лечения кератоконуса методом трансэпителиального кросслинкинга роговичного коллагена. Офтальмология. 2016;13(1): 4–9. [Bikbov MM, Surkova VK, Bikbova GM, Zainullina NB. Сlinical results of transepithelial corneal collagen crosslinking in patients with keratoconus. Ophthalmology in Russia. 2016;13(1): 4–9. (In Russ.).] https://doi.org/10.18008/1816-5095-2016-1-4-9
