Результаты трансплантации фрагментов эпителия слизистой губы на бесклеточную донорскую роговицу в эксперименте in vitro
Ключевые слова:
синдром лимбальной недостаточности, двусторонний синдром лимбальной недостаточности, культивирование эпителия слизистой губы, пересадка эпителия слизистой полости ртаАннотация
На сегодняшний день отсутствует единый подход к лечению пациентов с двусторонним синдромом лимбольной недостаточности. Одним из подходов является использование аутологичного эпителия слизистой губы или щеки: трансплантация культивированного эпителия слизистой полости рта (COMET), простая трансплантация эпителия слизистой полости рта (SOMET), паралимбольная трансплантация слизистой полости рта (PLOMET).
Цель. На основании эксперимента обосновать применение нового способа реэпителизации роговицы с использованием фрагментов аутологичного лоскута эпителия слизистой губы и донорской бесклеточной роговицы.
Материал и методы. Фрагмент слизистой оболочки полости рта был взят у пациента во время проведения PLOMET. Механически удален подслизистый слой, трансплантат разделен на 12 фрагментов по 0,5 мм. Далее в корнеосмеральном диске на роговице с использованием искусственной камеры и низкоэнергетического фемтосекундного лазера сформировали 8 туннелей. При помощи шпателя фрагменты слизистой губы были размещены по одному в каждом туннеле. Далее роговицу помещали в чашку с питательной средой для культивирования клеток. Среду заменили через 24 ч с последующей заменой каждые 3 дня. После 21 дня культивирования донорскую роговицу изучали методом гистологического и иммуногистоматического (ИГХ) анализа. Контроль – 4 фрагмента слизистой губы, культивированные в аналогичных условиях.
Результаты. По результатам гистологического исследования – трансплантат слизистой губы свободно расположен на поверхности роговицы и склеры, новообразованный эпителий представлен 1–2 слоями с элементами псевдорядности. ИГХ выявила положительное окрашивание кератинов 4, 13, которые характерны для поверхностных и промежуточных слоев неороговевающего эпителия слизистой губы.
Заключение. Проведенный эксперимент подтвердил возможность роста эпителия из фрагментов слизистой губы на поверхности бесклеточной донорской роговицы. Окончательный результат и эффективность такого подхода следует изучить в клинической практике.
Библиографические ссылки
1. Nakamura T, Endo KI, Cooper LJ, et al. The successful culture and autologous transplantation of rabbit oral mucosal epithelial cells on amniotic membrane. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2003;44(1): 106–116. doi: 10.1167/iovs.02-0195
2. Ngowyutagon P, Prabhasawat P, Chirapapaisan C, et al. Successful Ocular Surface Reconstruction in Complete Ankyloblepharon With the Simple Oral Mucosal Epithelial Transplantation Technique: A Case Report. Cornea. 2021;40(11): 1482–1486. doi: 10.1097/ICO.0000000000002638
3. Ballen PH. Mucous Membrane Grafts in Chemical (Lye) Burns. Am J Ophthalmol. 1963;55(2): 302–312. doi: 10.1016/0002-9394(63)92687-4
4. Gipson IK, Geggel HS, Spurr-Michaud SJ. Transplant of Oral Mucosal Epithelium to Rabbit Ocular Surface Wounds In Vivo. Arch Ophthalmol. 1986;104(10): 1529–1533. doi: 10.1001/archopht.1986.01050220103039
5. Malyugin B, Kalinnikova S, Isabekov R, et al. Diagnostic Algorithm for Surgical Management of Limbal Stem Cell Deficiency. Diagn Basel Switz. 2023;13(2): 199. doi: 10.3390/diagnostics13020199
6. Zhu YF, Qiu WY, Xu YS, Yao YF. Clinical efficacy of a new surgical technique of oral mucosal epithelial transplantation for severe ocular surface disorders. BMC Ophthalmol. 2023;23(1): 145. doi: 10.1186/s12886-023-02879-4
7. Kara N, Dogan L. Simple Oral Mucosal Epithelial Transplantation in a Patient With Bilateral Limbal Stem Cell Deficiency. Eye Contact Lens Sci Clin Pract. 2021;47(1): 65–67. doi: 10.1097/ICL.0000000000000744
8. Choe HR, Yoon CH, Kim MK. Ocular Surface Reconstruction Using Circumferentially-trephined Autologous Oral Mucosal Graft Transplantation in Limbal Stem Cell Deficiency. Korean J Ophthalmol. 2019;33(1): 16. doi: 10.3341/kjo.20180111
9. Umfress AC, Mawn LA, Joos KM, et al. Surgical management of large bilateral epibulbar dermoids with autologous oral mucous membrane transplantation. Am J Ophthalmol Case Rep. 2020;20: 100982. doi: 10.1016/j.ajoc.2020.100982
10. Cheung AY, Eslani M, Kurji KH, et al. Long-term Outcomes of Living-Related Conjunctival Limbal Allograft Compared With Keratolimbal Allograft in Patients With Limbal Stem Cell Deficiency. Cornea. 2020;39(8): 980–985. doi: 10.1097/ICO.000000000002329
11. Oie Y, Komoto S, Kawasaki R. Systematic review of clinical research on regenerative medicine for the cornea. Jpn J Ophthalmol. 2021;65(2): 169–183. doi: 10.1007/s10384-021-00821-z
12. Kate A, Basu S. A Review of the Diagnosis and Treatment of Limbal Stem Cell Deficiency. Front Med. 2022;9: 836009. doi: 10.3389/fmed.2022.836009
13. Malyugin BF, Kalinnikova SY, Knyazer B, Gerasimov MY. Midterm Outcomes of Autologous Glueless Simple Limbal Epithelial Transplantation for Unilateral Limbal Stem Cell Deficiency. Cornea. 2024;43(1): 45–51. doi: 10.1097/ICO.000000000003279
14. Gong D, Yan C, Yu F, et al. Direct oral mucosal epithelial transplantation supplies stem cells and promotes corneal wound healing to treat refractory persistent corneal epithelial defects. Exp Eye Res. 2022;215:108934. doi:10.1016/j.exer.2022.108934
15. Smith LR, Cho S, Discher DE. Stem Cell Differentiation is Regulated by Extracellular Matrix Mechanics. Physiol Bethesda Md. 2018;33(1):16–25. doi:10.1152/physiol.00026.2017
16. Tao Q, Qiao B, Lv B, Zheng C, Chen Z, Huang H. p63 and its isoforms as markers of rat oral mucosa epidermal stem cells in vitro. Cell Biochem Funct. 2009;27(8):535–541. doi:10.1002/cbf.1612
